多肽的溶解和保存
我們化學(xué)合成的多肽以凍干的形式提供。以下是我們經(jīng)驗(yàn)豐富的多肽合成工程師整理的多肽保存技巧和使用時(shí)的多肽溶解建議，用以保持合成肽的完整性和活性。
多肽保存和處理
凍干多肽通常是穩(wěn)定的，可在常溫條件下運(yùn)輸。收到后，我們建議將多肽存放在冷凍干燥的地方。一般情況下，凍干肽可在室溫下保存最多 1 個(gè)月，在冰箱中冷藏保存最多 1 年，需要長(zhǎng)期保存時(shí)需要在-20℃以下保存。
將凍干多肽從冰箱中取出時(shí)，打開多肽瓶之前讓小瓶升溫至室溫，以防止大氣中的水凝結(jié)到多肽上。因?yàn)槎嚯耐ǔ＞哂形鼭裥圆⑶胰菀壮苯狻Ｒ虼?，為了防止多肽粉吸潮降解或者使多肽難以處理，我們建議根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)要求對(duì)肽進(jìn)行等分，并避免重復(fù)凍和頻繁打開多肽包裝瓶。
含有 Cys、Met 和 Trp 殘基的多肽，容易氧化，這可能會(huì)導(dǎo)致多肽變色（褐變），時(shí)間久了可能會(huì)失去活性。因此，建議避免講多肽暴露于空氣中。
儲(chǔ)存在溶液中的多肽穩(wěn)定性較差，也容易受到微生物的影響。因此，我們建議使用 pH 5-6 的無(wú)菌緩沖液來(lái)溶解肽、等分樣品，并在不使用時(shí)將溶液儲(chǔ)存在 -20°C 下。使用 0.2 μm 過(guò)濾器過(guò)濾多肽溶液也可能有助于去除細(xì)菌污染。為了長(zhǎng)期保存，還可以將多肽再次冷凍干燥以除去溶劑。
為了方便您的研究，我們可以提供多肽分裝，方便使用。如需多肽合成報(bào)價(jià)，請(qǐng)與聯(lián)系我們，我們會(huì)盡快給您回復(fù)。
多肽溶解
無(wú)錫邁默拓普生物科技有限公司提供的多肽以凍干形式提供，在用于各種檢測(cè)之前需要溶解。尋找一種能夠完全溶解多肽而不影響其穩(wěn)定性，還能與實(shí)驗(yàn)兼容的溶劑可能是一個(gè)困難且費(fèi)力的過(guò)程。以下是我們的多肽化學(xué)家提供的多肽溶解度測(cè)試提示。
多肽溶解的技巧
多肽的溶解度主要由肽序包含的氨基酸的物理性質(zhì)決定的。氨基酸有疏水性和親水性之分。疏水性氨基酸多的肽很難溶解在水中，可能需要使用有機(jī)溶劑。親水性氨基酸殘基越多，多肽就越容易溶解在水溶液中。氨基酸還有酸性堿性的差別，酸性多肽在堿性條件下在較高 pH 值下更易溶解，而整體呈堿性的肽在較低 pH 值下最易溶解。下面是確定多肽溶解最佳溶劑的操作建議。
· 進(jìn)行溶解度測(cè)試時(shí)使用少量多肽，通常1毫克的量就可以了。
· 首次溶解未知溶解度的肽時(shí)，先從揮發(fā)性溶劑開始。方便將其從緩沖液中通過(guò)凍干去除，并在必要時(shí)再次嘗試溶解。
· 計(jì)算多肽的凈電荷，以確定肽是酸性還是堿性，并決定使用的最佳緩沖液 pH 條件。
如果多肽的凈電荷為正，則該肽呈堿性，可以用 10-30% 的乙酸溶液進(jìn)行測(cè)試。相反，如果凈肽電荷為負(fù)，則認(rèn)為肽呈酸性，建議使用 0.5% 氫氧化銨溶液。如果您的多肽含有二硫鍵，請(qǐng)勿使用后一種方法，因?yàn)楦?/span> pH 值可能會(huì)導(dǎo)致二硫鍵斷開。
· 對(duì)于中性肽，首先使用有機(jī)溶劑，例如乙腈、甲醇或異丙醇。對(duì)于疏水性很強(qiáng)的肽，二甲基亞砜 (DMSO) 在溶解肽方面特別有用，并且具有細(xì)胞耐受性的優(yōu)點(diǎn)。但DMSO很難通過(guò)干燥除去，因此最好在多肽原液中加入少量高純級(jí)DMSO直至溶解，然后緩慢加入水或緩沖溶液稀釋DMSO的含量。持續(xù)且溫和的攪動(dòng)。如果多肽開始沉淀出來(lái)，則停止加水。使用其他有機(jī)溶劑時(shí)也可以用此操作流程。
· 注意，DMSO不適用于含有半胱氨酸的多肽，因?yàn)樗鼤?huì)促進(jìn)二硫鍵的形成。對(duì)于含有半胱氨酸的肽，可以使用DMF代替。
· 溫和加熱和超聲處理有助于多肽溶解。對(duì)易于聚集的多肽，添加離液劑（例如 6 M 鹽酸胍或 8 M 尿素）可能有助于破壞氫鍵并防止多肽凝膠化。
· 完全溶解的多肽為透明溶液。溶液渾濁，或者如果可以觀察到顆粒，則表明多肽仍處未完全溶解狀態(tài)，需要進(jìn)一步測(cè)試。
我們的多肽合成工程師擁有多年的多肽合成研究經(jīng)驗(yàn)，多肽溶解度測(cè)試，是我們多肽定制合成服務(wù)的一部分，如需要，請(qǐng)聯(lián)系我們。